De veel voorkomende problemen en oplossingen bij het peptidesyntheseproces omvatten de volgende aspecten:
Peptidegehalte: Peptidegehalte verwijst naar het percentage peptidestoffen in een monster ten opzichte van niet-peptidestoffen. In peptideproducten worden naast het peptide zelf ook niet-zoutcomponenten opgenomen die tijdens het productieproces worden geïntroduceerd, zoals water, geabsorbeerde oplosmiddelen, coördinatie-ionen en zouten.
Chemische stabiliteit:
Deamidatiereactie: Asn/Gin-residuen worden gemakkelijk gehydrolyseerd om Asp/Glu te vormen.
Hydrolyse: Peptidebindingen in peptiden worden gemakkelijk verbroken door hydrolyse, vooral die gevormd door deelname van Asp, vooral Asp Pro- en Asp Gly-peptidebindingen.
Racemisatiereactie: Alle aminozuurresiduen behalve Gly hebben chirale alfakoolstofatomen en zijn gevoelig voor racemisatiereacties onder alkalische katalyse. Asp-residuen zijn het meest vatbaar voor racemisatiereacties.
- Afbraak door eliminatie: Cys, Ser, Thr, Phe, Tyr en andere residuen kunnen allemaal worden afgebroken door - eliminatie, wat waarschijnlijker is bij alkalische pH en wordt beïnvloed door temperatuur en metaalionen
Fysieke stabiliteit:
Denaturatie, adsorptie, aggregatie of precipitatie: Denaturatie van peptiden houdt gewoonlijk verband met de vernietiging van de tertiaire en secundaire structuren. In gedenatureerde toestand zijn peptiden gevoeliger voor chemische reacties en is hun activiteit moeilijk te herstellen. Het tijdens het denaturatieproces gevormde tussenproduct heeft een lage oplosbaarheid en is gevoelig voor aggregatie en precipitatie
behoud:
Beste bewaaromstandigheden: Peptiden worden over het algemeen bewaard in de vorm van gevriesdroogd poeder, dat zeer stabiel is bij -20 graden, vooral na vriesdrogen, en bewaard in een droger van -20 graden. De meeste peptiden kunnen bij deze temperatuur meerdere jaren zonder verandering worden bewaard. Om de impact van vochtigheid te verminderen, moeten gevriesdroogde peptiden onder droge omstandigheden op kamertemperatuur worden gebracht voordat ze aan de lucht worden blootgesteld.
Verpakking: Hesheng Biotechnology beveelt kleine verpakkingen aan om herhaalde vries-dooicycli te voorkomen, het aantal openingen en sluitingen van containers te verminderen, waardoor de kans op onjuiste behandeling of bacteriële besmetting wordt verkleind, en de stabiliteit van peptiden wordt gegarandeerd
Zuiverheidstesten:
Zuiverheidsgarantie: Alle geleverde peptiden hebben de vereiste zuiverheid bereikt en peptiden die niet aan de norm voldoen, worden weggegooid. De HPLC- en MS-detectieresultaten kunnen de zuiverheid en het molecuulgewicht van het peptide verifiëren, terwijl de belangrijkste onzuiverheden worden weergegeven.
Andere detectiemethoden, zoals aminozuuranalyse of elementanalyse, kunnen de aminozuursamenstelling van peptiden bevestigen als aanvullend middel voor peptidebevestiging
Synthesetechnologie:
Vaste fase peptidesynthese: Vaste fase peptidesynthese vereist geen zuivering van tussenproducten, waardoor continue syntheseprocessen mogelijk zijn en de basis wordt gelegd voor de automatisering van peptidesynthese. Gebaseerd op de chemische synthese van Fmoc werd het doelpeptide gesynthetiseerd door de carboxylgroep van het C-terminale aminozuur covalent te koppelen aan een onoplosbare polymeerhars, en vervolgens te beginnen met de aminogroep van het aminozuur.
De bovenstaande inhoud vat veelvoorkomende problemen en tegenmaatregelen bij de peptidesynthese samen, waarbij meerdere aspecten worden behandeld, zoals chemische stabiliteit, fysische stabiliteit, opslagomstandigheden, zuiverheidstesten, enz.