Biotinepeptiden

Wat zijn gebiotinyleerde peptiden?

Gebiotinyleerde peptiden zijn peptiden die zijn gemodificeerd om een ​​biotinegroep te omvatten. Deze modificatie maakt gebruik van de interactie met hoge- affiniteit tussen biotine en avidine of streptavidine, die veel wordt gebruikt in biologische en biochemische toepassingen. Het biotinemolecuul is klein, stabiel en verandert de structuur of functie van het peptide niet significant, terwijl het zeer efficiënte opvang of detectie mogelijk maakt via op avidine-gebaseerde systemen.

 

Chemische modificatie
Biotine wordt doorgaans geïntroduceerd via een NHS-biotine (N-hydroxysuccinimidebiotine)-reagens, dat reageert met primaire aminegroepen die worden aangetroffen op de N--terminus of lysineresiduen van het peptide, waardoor een stabiele amidebinding wordt gevormd.

生物素(Biotine) 肽(Peptide)

COOHNH₂

| |

+---EDC/NHS---→ 活化羧基(Activering) → 缩合(Koppeling)

↓ ↓

Biotine-CONH-Peptide

 

Affiniteitsinteractie
Het gebiotinyleerde peptide kan sterk binden (Kd ~10⁻¹⁵ M) aan avidine of streptavidine, waardoor het ideaal is voor gebruik in testen die nauwkeurige detectie, opvang of immobilisatie vereisen.

Gevallen van gebiotinyleerde peptidesynthese

Peptidesequentie: Biotine-Ahx-YXXXXXRXRRR-NH2

Lengte: 11A

Purity: >95%

M.W: 1898.32

Peptidesequentie: Biotine-YXXXXXRXRRR--ERXXXDLXXXXPVXXXXPRR

Lengte: 31A

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

Toepassingen van gebiotinyleerde peptiden

Gebiotinyleerde peptiden zijn veelzijdige hulpmiddelen in onderzoek en industrie, met een breed scala aan toepassingen, waaronder:

Affiniteitszuivering

Wordt gebruikt om bindingspartners zoals eiwitten, antilichamen of nucleïnezuren te zuiveren door het gebiotinyleerde peptide op streptavidinekorrels te immobiliseren.

ELISA en Western-blotting

Gebiotinyleerde peptiden fungeren als probes voor het detecteren van specifieke interacties wanneer ze worden gekoppeld aan avidine-HRP- of avidine-fluorescerende labels.

Oppervlakteplasmonresonantie (SPR)

Gebruikt voor het immobiliseren van peptiden op biosensorchips voor interactiestudies.

Ontdekking van medicijnen

Screenen van kandidaat-geneesmiddelen door hun binding aan gebiotinyleerde peptidedoelen te analyseren.

Immunologie

Gebiotinyleerde peptiden worden gebruikt om epitopen in kaart te brengen, antigeen-antilichaaminteracties te bestuderen en T--celtesten uit te voeren.

Epitoop in kaart brengen voor vaccinontwikkeling

Een op maat gemaakt gebiotinyleerd peptide werd gebruikt om antigene epitopen van een viraal eiwit te identificeren, wat hielp bij het ontwerpen van een kandidaat-vaccin.

Eiwit-Eiwitinteractiestudies

Gebiotinyleerde peptiden, geïmmobiliseerd op met streptavidine-gecoate platen, maakten de studie van receptor-ligand-interacties mogelijk, waardoor bindingsaffiniteiten aan het licht kwamen die cruciaal zijn voor de ontwikkeling van geneesmiddelen.

Immunoassay-optimalisatie

In een diagnostische test werden gebiotinyleerde peptiden gebruikt als antigenen om de gevoeligheid en specificiteit van de ELISA voor detectie van biomarkers voor ziekten te verbeteren.

 

Referenties

1. Groen, NM (1975).Avidine en streptavidine.Biochemisch tijdschrift, 131(3), 781-791.

2. Chaiet, L., & Wolf, FJ (1964).De eigenschappen van streptavidine, een biotine-bindend eiwit geproduceerd door Streptomyces.Archieven voor biochemie en biofysica, 106(1), 1-5.

3. Finn, FM, en Titus, G. (1994).Biotinylatie van eiwitten in onderzoek en biotechnologie.Anale Biochem, 218(1), 1-7.